期刊简介
本刊拥有一支由一流预防医学专家组成的编委会队伍。本刊坚持预防与临床结合，普及 与提高兼顾的办刊物色，集预防、医疗、保健、康复于一体。
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首页>上海预防医学杂志
- 杂志名称：上海预防医学杂志
- 主管单位：上海市卫生局
- 主办单位：上海市预防医学会
- 国际刊号：1004-9231
- 国内刊号：31-1635/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：首届《CAJ－CD规范》执行优秀期刊期刊收录：维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏
汉坦病毒S片段荧光定量PCR参考标准品的构建
周欣；李燕婷；沈荣明；沈微娟；瞿涤
关键词：S片段, 实时荧光定量PCR, 标准品
摘要：[目的] 构建汉坦病毒S片段标准品,用于实时荧光定量PCR检测汉坦病毒. [方法] 对S片段基因进行序列分析,利用引物设计软件设计出一对引物和一条荧光探针,提取病人总RNA,逆转录为cDNA,经PCR扩增,产物纯化后与PMD 18-T Vector连接,转化到大肠杆菌DH5α,筛选得到标准品的质粒,提取质粒并进行定量. [结果] 重组S片段基因质粒进行荧光定量PCR扩增出现强烈的荧光值增长,表明基因已成功克隆.以不同稀释水平的标准品进行扩增,统计学分析显示Ct 值与标准品浓度的对数存在良好线性关系,回归系数在0.99以上.成功制备并获得稳定的S片段重组质粒. [结论] 该方法能大量制备质粒标准品,如何进行荧光RT-PCR条件的优化是关键所在.
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